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免疫共积淀检测(CO-IP)

德泰生物供给免疫共积淀(CO-IP)检测办事。可对两种已知卵白是不是存在彼此感化停止考证,也能够考证在总卵白中是不是含有与已知卵白彼此感化的未知卵白。其尝试方式为将靶卵白(X)与方针卵白(Y)在统一细胞内孵育,构成“靶卵白-方针卵白”复合物。免疫共积淀检测办事将靶卵白的特同性抗体与复合物共孵育,构成“抗体-靶卵白-方针卵白”复合物,操纵Proterin A/G纯化。经由过程SDS-PAGE银染,连系Western Blot及液相质谱等对两种卵白之间是不是存在彼此感化停止定性阐发。

办事上风

  • 利用银染手艺,活络度是考马斯亮蓝100倍,SDS-PAGE电泳成果加倍清楚;
  • 具有液相质谱及Fortebio等完全配套检测装备,可对检测成果进一步阐发;
  • 尝试反复停止两次,解除随机身分影响,成果加倍靠得住;
  • 具有卵白、抗体等制备平台,您只要供给序列便可实现全数尝试;

免疫共积淀办事内容

办事内容 托付内容 周期 价钱
份子间彼此感化检测
(CO-IP尝试)
彼此感化阐发报告(包含SDS-PAGE成果、WB成果、液相质谱成果等) ~2周 询价

样品请求

卵白样品

  1. 间接供给卵白样品:动植物构造/器官或含有钓饵卵白及方针卵白的裂解液;
  2. 供给抒发质粒:质粒需测序考证,供给测序峰图,避免基因模板或抒发质粒自身碱基渐变,构成尝试耽搁;
  3. 供给基因序列:客户供给序列,由德泰担任钓饵卵白或方针卵白的抒发。

检测抗体

  1. 客户供给:用于免疫检测的抗体>20ul;
  2. 德泰供给:由德泰供给相干的抗体(概况可征询客服)。

免疫共积淀道理

免疫共积淀(Co-Immunoprecipitation)因此抗体和抗原之间的专注性感化为根本的卵白彼此感化研讨的典范方式。其道理为:将靶卵白X与方针卵白Y在细胞内配合孵育,构成复合物X-Y。若是用靶卵白X的抗体免疫积淀X,那末与X在体内连系的卵白质Y也能积淀上去。这类方式经常利用于测定两种已知卵白是不是在体内连系,也可用于肯定细胞内是不是存在与已知卵白彼此感化的未知卵白。(具体免疫共积淀道理先容
免疫共积淀尝试道理

图2:Co-IP尝试道理

CO-IP优错误谬误

长处 错误谬误
  • 彼此感化的卵白处于自然状况,都是颠末翻译后润色的
  • 能够分手获得自然状况下的彼此感化卵白复合物
  • 能够检测体外和细胞内的彼此感化
  • 检测不到弱亲和力和刹时的卵白彼此感化
  • 卵白的彼此感化能够不是二者间接连系,能够存在第三方的桥梁感化
  • 须在尝试前展望方针卵白,以挑选最初检测的抗体,不然尝试得不到成果
  • 假阳性率较高,实验须要设置准确的对比

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