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份子间彼此感化

卵白间彼此感化是性命景象产生的根本,研讨其彼此感化能够或许或许说明生物反映的机理,揭露性命景象的实质。固然有一些卵白能够或许或许以单体的情势阐扬感化,可是大局部的卵白都是经由进程卵白间彼此感化或构成卵白复合物来阐扬感化的。最近几年来,研讨份子彼此感化的手艺不时呈现。德泰生物供给卵白彼此感化检测办事,包含Fortebio octet生物膜层光学干与手艺(BLI)、免疫共积淀(CO-IP, Co-Immunoprecipitation)、GST pull-down等,能够或许或许完成对卵白,小份子,抗体及Fab片断等彼此感化的定性定量阐发。

卵白彼此感化检测办事

  • 生物膜层光学干与(BLI)
  • 卵白互作定性/定量阐发
  • 刹时/不变卵白彼此感化

  • 抗原抗体反映特同性
  • 卵白互作定性阐发
  • 体内彼此感化检测

  • GST-GSH偶联球珠特同性
  • 卵白互作定性阐发
  • 体外彼此感化检测

办事上风:

德泰专一卵白抒发,可按照您的检测请求,定制卵白
德泰专一卵白抒发,可按照您的检测请求,定制卵白
丰硕的小份子数据库资本,查找/挑选彼此感化小份子
丰硕的小份子数据库资本,查找/挑选彼此感化小份子
能够或许或许检测体外/体内,弱/强,刹时/不变卵白彼此感化
能够或许或许检测体外/体内,弱/强,刹时/不变卵白彼此感化

卵白彼此感化

以下首要先容了德泰卵白彼此感化检测的三种方式:Fortebio Octet ,免疫共积淀CO-IP,GST pull-down。每种方式有其合用性,可按照尝试请求挑选。

Fortebio octet

Octet® RED96体系是由ForteBio公司出产的全主动测试平台,该体系操纵生物膜层光学干与手艺,只要微量样品,无需纯化,便可对份子间彼此感化停止定性和定量的阐发。包含对多个已知或未知卵白的彼此感化力停止排序,判定其是不是存在卵白互作等。Fortebio octet检测活络度较高并能够或许或许测得及时的阐发成果,是以能够或许或许检测弱亲和力的彼此感化和刹时彼此感化。

Fortebio相干论文

免疫共积淀 CO-IP

免疫共积淀是检测卵白彼此感化的经常使用方式。以抗原抗体间的特同性为根本,特同性抗体从细胞抽提物中分手目标卵白和彼此感化卵白的复合物,免疫共积淀以后经由进程Western blot及质谱法肯定彼此感化卵白。CO-IP既能够或许或许判定已知两个卵白在体内的彼此感化,也能够或许或许挑选未知的彼此感化卵白,但都没法停止彼此感化的定量阐发,同时CO-IP的活络度较低,检测不到卵白间的弱彼此感化和刹时彼此感化,且尝试的假阳性率较高,设置准确的对比非常主要。

CO-IP相干论文

GST pull-down

GST融会卵白沉降手艺(GST pull down)操纵了GST对谷胱甘肽偶联球珠的亲和性,从非彼此感化卵白的溶液中纯化彼此感化卵白。该法能够或许或许判定与已知卵白彼此感化的未知卵白,也可判定两个已知卵白间是不是存在彼此感化。GST pull down的胜利操纵取决于是不是有充足多并坚持可溶性的GST重组融会卵白,德泰生物供给可溶性卵白抒发办事,并许诺不胜利零免费。

pull down相干论文

卵白彼此感化FAQ

1.若何挑选份子间彼此感化检测方式?

手艺 Fortebio octet CO-IP GST pull-down
道理 生物膜层光学干与手艺 (BLI) 抗原抗体反映的特同性 GST对谷胱甘肽偶联球珠的特同性
挑选互作卵白 X
考证互作卵白
刹时彼此感化 X X X
弱亲和力检测 X X
定量阐发 X X
定性阐发

2.德泰的份子间彼此感化检测办事上风?

  • 德泰能够或许或许供给样品制备到卵白互作检测一站式办事,包含卵白,抗原抗体等。咱们能够或许或许供给原核抒发或哺乳植物体系制备重组卵白,能够或许或许按照您的检测请求加上特定的标签。您能够或许或许挑选德泰的原核可溶性保障办事制备卵白,咱们许诺不胜利,零免费;
  • Fortebio octet,活络度高,测得弱亲和力彼此感化;及时监控,测得刹时彼此感化;尝试可取得具体数据,可对卵白彼此感化停止定量阐发,和差别卵白间的彼此感化力停止排序;
  • CO-IP,GST pull down用于对份子间彼此感化定性阐发,包含判定已知两个卵白是不是存在彼此感化,挑选与已知卵白互作的未知卵白;
  • 小份子库资本:专业手艺职员查找资本,在您不肯定彼此感化小份子的环境下,咱们能够或许或许在数据库中停止查找挑选;

3.甚么是Fortebio octet生物膜干与手艺?

  Octet® RED96体系是由ForteBio公司出产的全主动测试平台,可用于丈量卵白与份子间的彼此感化。该体系基于光纤生物传感器的生物膜层光学干与手艺,可测定生物份子间彼此感化的及时阐发成果。

Fortebio octet案例先容
份子间彼此感化

卵白彼此感化检测方式综述

跟着性命迷信研讨的不时成长,人们逐步认识到基因组信息已不能完整诠释和展望各类性命进程及景象,而卵白质作为细胞活性和功效的履行者,愈来愈遭到人们的存眷。但是,卵白质功效的阐扬不是凭仗单个卵白质自力履行,而是依托卵白质与卵白质彼此感化(protein-protein interaction, PPI)履行其功效。是以,卵白质彼此感化呈现非常将会影响细胞活性和功效的阐扬,从而激发很多疾病,如神经退行性疾病、癌症等。按捺这些非常的卵白质彼此感化对临床医治具备主要意思。

检测规模 检测方式
In vivo体内 免疫共积淀(Co-IP)
荧光共振能量转移(FRET)
临近卵白标记BioID
酵母双杂交(Yeast Two-hybrid)
In vitro体外 融会卵白沉降手艺(GSTPull down)
Far-Western
外表等离子共振(SPR)
TAP串连亲和纯化手艺
卵白质芯片手艺(Protein microarrays)

免疫共积淀

该手艺是研讨卵白彼此感化的典范手艺,操纵普遍且可托度较高。它操纵特同性抗体从细胞抽提物中分手目标卵白和彼此感化卵白的复合物,以后经由进程Western blot及质谱法肯定彼此感化卵白。若是在非变性的前提下裂解细胞,卵白间彼此感化能够或许或许坚持,以是便可操纵免疫共积淀方式找出彼此感化的卵白质。免疫共积淀既能够或许或许用于查验已知的两个卵白质在体内的彼此感化,也能够或许或许找出未知的卵白彼此感化。

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